ⅠN핵산i소개
핵산은 데옥시리보핵산(DNA)과 리보핵산(RNA)으로 나뉘며, 그 중 RNA는 기능에 따라 리보솜 RNA(rRNA), 메신저 RNA(mRNA), 전달 RNA(tRNA)로 구분됩니다.DNA는 주로 핵, 미토콘드리아, 클로로포름에 집중되어 있는 반면, RNA는 주로 세포질에 분포되어 있습니다.유전자 발현의 물질적 기초로서 핵산 추출은 분자 생물학 연구 및 임상 분자 진단에서 매우 중요한 역할을 합니다.핵산 추출의 농도와 순도는 후속 PCR, 시퀀싱, 벡터 구성, 효소 분해 및 기타 실험에 직접적인 영향을 미칩니다.
Ⅱ 핵산 추출 및 정제 방법
① 페놀/클로로포름 추출방법
페놀/클로로포름 추출은 DNA 추출을 위한 고전적인 방법으로, 주로 두 가지 서로 다른 유기 용매를 사용하여 샘플을 처리하고, DNA 기반 핵산을 물 상에 용해시키고, 지질을 유기 상에, 두 상 사이의 단백질을 용해시킵니다.이 방법은 비용이 저렴하고 순도가 높으며 효과가 좋다는 장점이 있습니다.단점은 조작이 복잡하고 시간이 오래 걸린다는 것입니다.
② 트리졸법
Trizol 방법은 RNA 추출의 고전적인 방법입니다.Trizol법은 클로로포름으로 원심분리한 후 수상과 유기상으로 나누어 RNA를 수상에 녹인 후 수상을 새로운 EP 튜브로 옮기고 이소프로판올을 첨가한 후 침전시킨 후 에탄올 정제하는 방법이다.이 방법은 동물 조직, 세포 및 박테리아로부터 RNA 추출에 적합합니다.
③ 원심컬럼 정제방법
원심분리 컬럼 정제 방법은 특수 실리콘 매트릭스 흡착 물질을 통해 DNA를 특이적으로 흡착할 수 있는 반면, RNA와 단백질은 원활하게 통과할 수 있으며, 고염 저 PH를 사용하여 핵산을 결합하고, 저염 고 PH 값 용출을 통해 핵산을 분리 정제할 수 있습니다.장점은 정제농도가 높고 안정성이 높으며, 유기용매가 필요 없고 비용이 저렴하다는 점입니다.단점은 단계별로 원심분리해야 하며 더 많은 작업 단계가 필요하다는 것입니다.
④ 마그네틱 비드 방식
자기비드법은 세포조직 시료를 파쇄물을 통해 분할하여 시료 중의 핵산을 방출시킨 후, 핵산 분자가 자기비드 표면에 특이적으로 흡착되고, 단백질, 당류 등의 불순물은 잔류하는 방식이다. 액체.세포 조직 분할, 핵산과의 자기 비드 결합, 핵산 세척, 핵산 용출 등의 단계를 거쳐 최종적으로 순수한 핵산을 얻습니다.장점은 단계 원심분리가 필요 없이 조작이 간단하고 사용 시간이 짧다는 것입니다.기술 요구 사항이 낮고 자동 및 대량 작업을 실현할 수 있습니다.자성비드와 핵산의 특수한 조합으로 추출된 핵산의 농도와 순도가 높아집니다.단점은 현재 시장 가격이 상대적으로 비싸다는 것입니다.
⑤ 기타 방법
위의 4가지 방법 외에 비등분해법, 농축염법, 음이온세정법, 초음파법, 효소법 등이 있다.
Ⅲ 핵산 추출 유형
포진은 세계 최고의 Direct PCR 플랫폼인 double-column RNA Isolation 플랫폼(DNA-only + RNA only)을 보유하고 있습니다.주요 제품에는 DNA/RNA 분리 키트, PCR 및 Direct PCR 시약 분자 실험실 시약 시리즈가 포함됩니다.
① 전체 RNA 추출
Total RNA 추출 시료에는 혈액, 세포, 동물 조직, 식물, 바이러스 등이 포함됩니다. total RNA 추출을 통해 고순도, 고농도의 total RNA를 얻을 수 있으며, 이는 RT-PCR, 칩 분석, in vitro 번역 등에 사용할 수 있습니다. 분자 복제, Dot Blot 및 기타 실험.
Foregene 관련RNA 분리 키트
동물 총 RNA 분리 키트--다양한 동물 조직에서 고순도, 고품질의 total RNA를 빠르고 효율적으로 추출합니다.
세포 총 RNA 분리 키트--다양한 배양세포로부터 고순도, 고품질의 total RNA를 11분만에 얻을 수 있습니다.
식물 총 RNA 분리 키트--다당류와 폴리페놀 함량이 낮은 식물 샘플에서 고품질 총 RNA를 신속하게 추출합니다.
바이러스성 RNA 분리 키트--혈장, 혈청, 무세포 체액, 세포 배양 상청액 등의 샘플에서 바이러스 RNA를 신속하게 분리하고 정제합니다.
② Genomic DNA 추출
Genomic DNA 추출 샘플에는 토양, 대변, 혈액, 세포, 동물 조직, 식물, 바이러스 등이 포함됩니다. Genomic DNA 추출은 효소 분해, DNA 라이브러리 구축, PCR, 항체 준비, Western blot hybridization 분석, 유전자 칩, 높은 수준에 사용할 수 있습니다. -처리량 시퀀싱 및 기타 실험.
Foregene 관련DNA 분리 키트
동물 조직 DNA 분리 키트--동물 조직, 세포 등 다양한 소스로부터 게놈 DNA를 신속하게 추출하고 정제합니다.
블러드 DNA 미디 키트 (1-5ml)--항응고 혈액(1-5ml)에서 고품질 게놈 DNA를 신속하게 정제합니다.
구강 면봉/FTA 카드 DNA 분리 키트--구강 면봉/FTA 카드 샘플에서 고품질 게놈 DNA를 신속하게 정제합니다.
식물 DNA 분리 키트--식물 샘플(다당류 및 폴리페놀 식물 샘플 포함)에서 고품질 게놈 DNA를 신속하게 정제하고 얻습니다.
③ 플라스미드 추출
플라스미드는 세포 내 일종의 원형 소분자 DNA로, DNA 재조합의 일반적인 운반체입니다.플라스미드 추출 방법은 RNA를 제거하고, 세균 게놈 DNA에서 플라스미드를 분리한 후, 단백질 및 기타 불순물을 제거하여 비교적 순수한 플라스미드를 얻는 방법입니다.
일반 플라스미드 미니 키트--형질전환 및 효소 소화와 같은 일상적인 분자 생물학 실험을 위해 형질전환된 박테리아로부터 고품질 플라스미드 DNA를 신속하게 정제합니다.
④ 기타 추출 유형, miRNA 추출 등
동물 miRNA 분리 키트--다양한 동물 조직 및 세포로부터 20-200nt miRNA, siRNA, snRNA의 작은 RNA 단편을 빠르고 효율적으로 추출
Ⅴ 핵산 추출 및 정제 결과 요건s
① 핵산의 1차 구조의 무결성을 보장합니다.
② 단백질, 당, 지질 및 기타 거대분자의 간섭을 줄입니다.
③ 핵산 시료에는 효소를 억제할 수 있는 유기용매나 고농도의 금속이온이 없어야 합니다.
④ DNA 추출 시 RNA 및 기타 핵산 오염이 제거되어야 하며, 그 반대의 경우도 마찬가지입니다.
게시 시간: 2022년 11월 24일
